Course Syllabus
Obiettivi
Lo studente deve saper descrivere le principali tecniche di biologia molecolare clinica basate sulla PCR (compresa la preparazione del campione)
Contenuti sintetici
Fornire agli studenti i fondamenti delle principali
tecniche strumentali impiegate nel laboratorio di biologia molecolare clinica.
Programma esteso
Tecniche di separazione dei linfociti da sangue intero. Tecniche di estrazione, purificazione, quantificazione e conservazione del DNA e dell’RNA: principi teorici e aspetti pratici. Enzimi di restrizione: aspetti teorici e applicazioni diagnostiche. Reazione di retrotrascrizione. Reazione di amplificazione degli acidi nucleici (PCR): parametri di amplificazione (denaturazione - ibridazione - estensione) e reagenti della reazione. Identificazione dei prodotti di amplificazione (elettroforesi su gel d’agarosio e sistemi di ibridazione). Tecniche di identificazione di mutazioni geniche: metodi indiretti (Southern Blot, DGGE, SSCP, PTT, CCM) e metodi diretti (RFLP, ASA, ASO). Sequenziamento di prodotti di PCR. Tecniche di determinazione di acidi nucleici virali (HCV, HBV, HIV).
Prerequisiti
Obiettivi del corso di Scienze Biomediche (trattasi
dei corsi indicati nelle propedeuticità del Regolamento)
Modalità didattica
Esercitazioni
Materiale didattico
Verrà fornito materiale didattico dal docente
Periodo di erogazione dell'insegnamento
Secondo semestre primo anno
Modalità di verifica del profitto e valutazione
Prova in itinere: Prova scritta per il controllo estensivo della preparazione sul programma di esame:
20 quiz, con 4 risposte, di cui solo una esatta.
Se lo studente non ha raggiunto la sufficienza, dovrà sostenere un esame orale consistente in un colloquio di approfondimento e discussione della prova scritta.
Il risultato della prova in itinere fa media con i risultati degli altri moduli.Orario di ricevimento
Su appuntamento richiesto per mail
Aims
To describe PCR and
molecular tests based on it (also sample preparation)
Contents
To provide the
fundamentals of the main principles of instrumental techniques
employed in Clinical Molecular Biology laboratory.
Detailed program
Techniques for the lymphocyte separation from whole blood. DNA and RNA extraction, purification, quantification and storage: theory and practical aspects. Restriction enzymes: theory and diagnostic applications. Retro transcription reaction. Polymerase chain reaction (PCR): parameters for the amplification (denaturation, hybridization, extension) master mix. Amplification products identification (agarose-gel electrophoresis and hybridization techniques). Genetic mutation identification: indirect (Southern Blot, DGGE, SSCP, PTT, CCM) and direct methods (RFLP, ASA, ASO). PCR product sequencing. Viral nucleic acid assays (HCV, HBV, HIV).
Prerequisites
Biomedical Sciences
Teaching form
Exercises
Textbook and teaching resource
Teacher will provide teaching material.
Semester
secondo semestre primo anno
Assessment method
In itinere test,
consisting of 20 written multiple choice test: if
the student has not reached the required level, he/she will have to take an
oral exam consisting in the discussion of some written questions.
Office hours
By appointment required by mail