Syllabus del corso
Obiettivi
Lo studente deve sapere:
- descrivere il funzionamento dei principali strumenti di misura di laboratorio biochimico-clinico;
- descrivere le caratteristiche generali dei metodi analitici;
- illustrare i principi di base e le applicazioni delle tecniche impiegate per le analisi biochimico-cliniche (anche in ambito veterinario): tecniche fotometriche, elettroforetiche, esame emocromocitometrico ed esame dell’urina, dosaggi enzimatici;
- descrivere le specializzazioni metaboliche dei principali organi e apparati e le analisi biochimico-cliniche utilizzate per esplorarle;
- descrivere le principali tecniche di biologia molecolare clinica basate sulla PCR (compresa la preparazione del campione).
Contenuti sintetici
Fornire agli studenti le conoscenze sulle specializzazioni metaboliche dei principali organi, e sulle basi biochimiche e fisiopatologiche delle alterazioni del quadro ematochimico evidenziabili dalle analisi Biochimico-cliniche.
Fornire agli studenti i fondamenti delle principali tecniche analitiche e strumentali impiegate nel laboratorio di biochimica clinica e biologia molecolare clinica.
Programma esteso
Strumenti di misura di laboratorio. Principi di base e applicazioni delle principali tecniche impiegate: tecniche fotometriche, tecniche elettroforetiche, esame emocromocitometrico ed esame dell’urina, dosaggi enzimatici. Valutazione dei metodi analitici (praticabilità, attendibilità e accuratezza).
Profili d’organo:
- metabolismo epatico di glucidi, lipidi, proteine, alcool e bilirubina ed analisi biochimico-cliniche relative;
- analisi biochimico-cliniche per l’esplorazione del metabolismo glucidico;
- metabolismo del tessuto adiposo. Biochimica clinica dei lipidi e delle lipoproteine;
- metabolismo del tessuto Muscolare e Cardiaco. Marcatori di lesione miocardica;
- metabolismo del tessuto Nervoso;
- metabolismo del globulo rosso. Anemie ed emoglobinopatie;
- biochimica clinica del rene ed equilibrio idroelettrolitico; le clearances renali, la creatinina e l’urea.
Interrelazioni metaboliche tra organi e tessuti. Biochimica clinica dell’osso e metabolismo minerale. Ferro e oligoelementi. Equilibrio acido-base e suo monitoraggio biochimico-clinico.
Tecniche di separazione dei linfociti da sangue intero. Tecniche di estrazione, purificazione, quantificazione e conservazione del DNA e dell’RNA: principi teorici e aspetti pratici. Enzimi di restrizione: aspetti teorici e applicazioni diagnostiche. Reazione di retrotrascrizione. Reazione di amplificazione degli acidi nucleici (PCR): parametri di amplificazione (denaturazione - ibridazione - estensione) e reagenti della reazione. Identificazione dei prodotti di amplificazione (elettroforesi su gel d’agarosio e sistemi di ibridazione). Tecniche di identificazione di mutazioni geniche: metodi indiretti (Southern Blot, DGGE, SSCP, PTT, CCM) e metodi diretti (RFLP, ASA, ASO). Sequenziamento di prodotti di PCR. Tecniche di determinazione di acidi nucleici virali (HCV, HBV, HIV).
Modalità didattica
Insegnamento con diverse modalità didattiche, dettagli nei singoli moduli
Materiale didattico
SPANDRIO L. BIOCHIMICA CLINICA, ED SORBONA
SILIPRANDI N. TETTAMANTI G. BIOCHIMICA MEDICA ED PICCIN
Periodo di erogazione dell'insegnamento
Secondo semestre
Modalità di verifica del profitto e valutazione
Il modulo "Biochimica Clinica" prevede un test a risposte chiuse, gli altri moduli un colloquio sugli argomenti svolti a lezione.
Orario di ricevimento
I docenti ricevono per appuntamento. Scrivere una mail
Sustainable Development Goals
Aims
Students' skills:
- to describe the most used instruments and materials in BC labs;
- to describe the main biochemical assays;
- to illustrate the basic principles and applications of clinical biochemical techniques: photometric, electrophoresis techniques, hemochromocytometric and urine test, enzymatic assays;
- to describe the metabolic features of the main organs and tissues and tests used to assess them;
- to describe PCR and molecular tests based on it (also sample preparation).
Contents
To provide knowledge about metabolic specificities of main organs and tissues, and on the biochemical and physio-pathological basis of laboratory analysis alterations.
To provide the fundamentals of the main principles of analytical and instrumental techniques employed in Clinical Molecular Biology and Biochemistry laboratory.
Detailed program
Laboratory instrumentation. Basic principles and applications of the main lab techniques: photometric, electrophoresis techniques, hemo-chromo-cytometric and urine test, enzymatic assays. Evaluation of analytical methods (practicability, reliability, bias).
Organ profiles: glucose, lipid protein, ethanol and bilirubin hepatic metabolism, and relates tests. Adipose tissue metabolism, Lipid and lipoprotein metabolism, muscular and myocardial metabolism. Myocardial markers. Nervous system metabolism.
Red cells metabolism. Anaemia and hemoglobinopathies.
Kidney metabolism and hydro-electrolytic balance; renal clearances, creatinine and urea. Metabolic interrelations. Bone and mineral metabolism. Iron balance. Acid-base balance and its regulation.
Techniques for the lymphocyte separation from whole blood. DNA and RNA extraction, purification, quantification and storage: theory and practical aspects. Restriction enzymes: theory and diagnostic applications. Retro transcription reaction. Polymerase chain reaction (PCR): parameters for the amplification (denaturation, hybridization, extension) master mix. Amplification products identification (agarose-gel electrophoresis and hybridization techniques). Genetic mutation identification: indirect (Southern Blot, DGGE, SSCP, PTT, CCM) and direct methods (RFLP, ASA, ASO). PCR product sequencing. Viral nucleic acid assays (HCV, HBV, HIV).
Teaching form
Lectures and exercises
Textbook and teaching resource
SPANDRIO L. BIOCHIMICA CLINICA, ED SORBONA
SILIPRANDI N. TETTAMANTI G. BIOCHIMICA MEDICA ED PICCIN
Semester
Second semester
Assessment method
written and orale exam
Office hours
By appointment required by mail
