- Medicine and Surgery
- Single Cycle Master Degree (6 years)
- Medicine and Surgery [H4102D]
- Courses
- A.A. 2023-2024
- 2nd year
- Immunology II
- Summary
Course Syllabus
Obiettivi
Il corso di Immunologia II fornisce agli studenti la conoscenza teorica di alcune tecniche base di laboratorio di immunologia cellulare e molecolare. Il corso fornirà competenze sulle tecniche di immunologia. Al termine del corso lo studente sarà in grado di comprendere come funzionano alcune tecniche di laboratorio.
Contenuti sintetici
• tecniche di isolamento Preparazione di leucociti da campione di sangue
• tecniche per la Produzione di anticorpi. Anticorpi monoclonali e loro applicazioni.
• Interazione antigene-anticorpo, Immunofluorescenza diretta e indiretta. Immunoistochimica.
• Immunoassay: immunoblotting, immunoprecipitazione. ELISA test.
Programma esteso
Reazioni di agglutinazione: emoagglutinazione e gruppo sanguigno, test antiglobulinico diretto (Coomb diretto) e indiretto (Coombs indiretto) per la ricerca di anticorpi contro gli antigeni dei globuli rossi, malattia emolitica del neonato (HDN), test di compatibilità pretrasfusionale.
Saggi immunologici: saggio di immunoassorbimento enzimatico (ELISA), saggio ELISA per il rilevamento di anticorpi ADAMTS-13 e anti-ADAMTS-13 nella porpora trombotica trombocitopenica, saggio ELISA per il rilevamento di anticorpi anti-PF4 indotti da eparina e loro caratterizzazione funzionale: descrizione di un caso .
Isolamento di leucociti da campioni di sangue: Cluster di differenziazione, isolamento di linfociti del sangue periferico e leucociti polimorfonucleati mediante frazionamento in gradiente di densità, isolamento dei linfociti mediante biglie magnetiche rivestite di anticorpi, leucaferesi e CAR-T
Citometria a flusso e analisi FACS: principi e applicazioni: immunofenotipizzazione dei leucociti, immunofenotipizzazione delle piastrine per malattie emorragiche rare, sottopopolazioni linfocitarie in campioni di sangue periferico, sottopopolazioni linfocitarie nel liquido di lavaggio broncoalveolare, rilevazione dell'emoglobina fetale, tipizzazione HLA-B27.
Reazioni di precipitazione : Titolazione anticorpale nel siero, saggi di flocculazione e VDRL, precipitazione in agar e test di Ouchterlony, immunodiffusione radiale (RID) e sua applicazione alla misurazione dell'antitrombina nel plasma.
Immunoblotting (western blotting): principi e applicazioni, saggio Western Blot per le proteine del virus dell'HIV.
Prerequisiti
Conoscenze relative a basic immunology
Modalità didattica
Presentazione delle tecniche in aula.
Materiale didattico
Pubblicazioni scientifiche e tecniche.
Periodo di erogazione dell'insegnamento
Primo semestre
Modalità di verifica del profitto e valutazione
L'esame prevede una prova scritta con domande a risposta multipla sugli argomenti trattati nel corso delle lezioni, somministrata insieme al test di immunologia I
Orario di ricevimento
L'appuntamento con gli studenti sarà fissato inviando una mail
Sustainable Development Goals
Aims
The Immunology II course provides students with the theoretical knowledge of some basic cell and molecular immunology laboratory techniques. The course will provide skills on immunology techniques. At the end of the course the student will be able to understand how some laboratory techniques work.
Contents
• Isolation of leukocytes from blood samples
• Antibody production. Monoclonal antibodies and their applications.
• Antigen-antibody interaction, direct and indirect immunofluorescence. Immunohistochemistry.
• Immunoassay: immunoblotting, immunoprecipitation. ELISA test.
Detailed program
Agglutination reactions: Hemagglutination and blood typing, The Coombs direct and indirect tests, Hemolytic disease of the newborn (HDN), pretransfusion compatibility tests.
Immunoassays: enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), ELISA detection of ADAMTS-13 and anti-ADAMTS-13 antibodies in thrombotic thrombocytopenic purpura, ELISA assay for detection of heparin-induced PF4 antibodies and their functional characterization: a case description.
Isolation of leukocytes from blood samples: Cluster of differentiation, isolation of peripheral blood lymphocytes and polymorphonuclear leukocytes by density-gradient fractionation, lymphocyte isolation using antibody coated magnetic beads, leukapheresis and CAR-T
Flow cytometry and FACS analysis: principles and applications: immunophenotyping of leukocytes, imuunophenotyping of platelets for rare bleeding disorders, lymphocyte subpopulations in peripheral blood samples, lymphocyte subpopulations in bronchoalveolar lavage fluid, fetal hemoglobin detection, HLA-B27 typing.
Precipitation reactions : Antibody titration in serum, Flocculation Assays and VDRL, Precipitation in agar and The Ouchterlony test, Radial immunodiffusion (RID) and its application to antithrombin measurement in plasma.
Immunoblotting (western blotting): principles and applications, Western Blot assay for HIV proteins.
Prerequisites
Knowledge related to basic immunology
Teaching form
Presentation of classroom techniques.
Textbook and teaching resource
Scientific and technical publications.
Semester
First semester
Assessment method
The exam includes a written test with multiple choice questions on the topics covered during the lessons, administered together with the immunology I test
Office hours
The appointment for students will be set by email to the Prof.